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EDTA抗原修复液(pH8.0)是一种常用的抗原修复液，可以用于多聚甲醛、甲醛或其它醛类试剂固定后的石蜡切片、冰冻切片的抗原修复。

细胞或组织用多聚甲醛、甲醛或其它醛类试剂固定后，会导致蛋白之间的交联，从而遮蔽样品的抗原位点，导致免疫染色时染色信号减弱，甚至出现一些假阳性染色结果。

通常石蜡切片都需进行抗原修复处理，而冰冻切片可以不进行抗原修复处理。抗原修复会大大改善石蜡切片的免疫染色效果，但对于冰冻切片的染色效果很多文献资料表明也有显著改善。特别是当冰冻切片免疫染色效果欠佳时，可以考虑尝试进行抗原修复。从原理上来看，无论冰冻切片还是细胞爬片等，只要是用多聚甲醛、甲醛或其它醛类试剂固定的样品，进行抗原修复都会有效去除蛋白之间的交联，充分暴露抗原表位，从而大大改善免疫染色效果。

• 本抗原修复液使用前须用重蒸水或去离子水稀释50倍，配制成1×抗原修复液。
  
• 这个溶液对许多抗体有较好的修复作用，但常会产生高背景(可能是由于这种处理之后内源性生物素暴露导致的)。因此，对于低亲和度的抗体或抗原不敏感时，一抗常需要较高的稀释倍数。
  
• 抗原修复的时间为建议时间，请根据不同的样品、抗体和抗原自行摸索。
  
• 抗原修复后，待溶液冷却至室温后再取出切片，使抗原表位在经历高温后复原。
  
• 抗原修复液的加入量要足以淹没切片几厘米，防止在煮沸过程中切片变干。
  
• 抗原修复过程需使用耐热染色架进行操作。
  
• 为了您的安全和健康，请穿实验服戴一次性手套操作。

• 高压蒸汽法
  
  • 抗原修复：压力锅中加入足以淹没切片的1×抗原修复液，加热至沸腾。
    
  • 将脱蜡至水的切片置染色架上，放入锅中，盖好锅盖，扣上压力阀加压，设置保压4min。
    
  • 压力下降后打开锅盖，放置室温冷却，待溶液冷却至室温后取出切片。
    
  • PBS或TBS洗涤3次，每次5min，随后即可进行后续的免疫染色步骤。
• 蒸煮锅法
  
  • 将置于染色架上的切片放于1×抗原修复液中，95～100℃加热10～20min。
    
  • 冷却至室温后取出，PBS或TBS洗涤3次，每次5min，随后即可进行后续的免疫染色步骤。
• 微波法
  
  • 向微波炉专用容器中加入1×抗原修复液，加热至沸腾。
    
  • 将脱蜡至水的切片置染色架上，放于容器中，煮沸10～20min。
    
  • 冷却至室温后取出，PBS或TBS洗涤3次，每次5min，随后即可进行后续的免疫染色步骤。
• 对于其他切片
  对于其它样品的抗原修复，可以参考石蜡切片的步骤进行。